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用。”李欣瑶郁闷了一下，“我在省里申请个课题，直接被否了，我怀疑人家都没仔细看。”
她这个年龄敢于申请课题的几乎都是博士学历，竞争相当激烈，年纪轻轻想出头哪有那么容易。之前她看的很开，但最近受了男友的刺激，又斗志昂扬的写了个申请课题递了上去，结果不出所料，心理大受打击。
所以萌生了退休躺平的念头。
“哎呦，你跟高风较什么劲啊，他优秀你高兴就完事了，哪能两个人都这么厉害啊，那样别人怎么活。”李妈劝女儿道。
“好好上你的班，有个工作多好，别人都羡慕不来呢。”李爸也教育道。
这边高风来到科研楼的时候，李友良、胡嘉然、程松、齐楠楠四人都在，由于刚分过钱，大家脸上的笑意怎么都掩藏不住。
特别是当齐楠楠和程松知道这只是第一笔款项后，说话的声音都有点发抖了。
齐楠楠今天面对小白鼠的时候都特别温柔，还仔仔细细的把笼子全都给擦了一遍，这会也不嫌臭了。
“两个事，一是我们需要注册一个公司，以后可能要经常跟别的企业打交道，很多事情公对公的话更方便一些。这个事友良负责跟进下，主要是先了解下大致的流程，免得到时候两眼一黑。”
“二是催化底物的事，齐惠仁今天下午给我打电话了，想要半个月内先送过去一批，他们着急用。”
“我在网上订购了一批仪器，这几天就能到，先送到友良家那里，整备好之后我先给他们合成一批发过去。”
这个事已经提前跟李友良商量好了，现在这个时候不适合在医院科研楼这边合成催化底物，要不然解释起来很麻烦。
而且合成这个催化底物的原料很简单，在哪都能买到，主要的设备就是几台温控仪加上离心机和色谱仪。
高风自掏腰包也没花几个钱，买的二手的设备，能用就行了。
几人商量了一下后，便又开始了之前的实验，在系统给具的实验流程中，单克隆抗体制备过程中的筛选被分为2步。
第一次筛选：
细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的hat选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（h）、氨基喋呤（a）和胸腺嘧啶核苷酸（t）。其依据是细胞中的dna合成有两条途径：
一条途径是生物合成途径（“d途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为dna分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而hat培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断dna合成的“d途径”。
另一条途径是应急途径或补救途径（“s途径”），它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（hgprt）和胸腺嘧啶核苷激酶（tk）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。因此，在hat培养液中，未融合的效应b细胞和两个效应b细胞融合的“d途径”被氨基喋呤阻断，虽“s途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10d左右会死亡。
第二次筛选：
在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应b淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。
实验到了这一步基本上也到了收尾阶段，第一次筛选操作很简，难点在第二次筛选上：需要将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞）。
